تؤثر إضافة بعض المواد إلى وسط الإنتاج إيجاباً أو سلباً في الإنتاج. لهذا هدف البحث إلى عزل وتشخيص بكتريا B. stearothermophilus من مختلف الترب العراقية وتحديد الظروف المثلى لإنتاج إنزيم Thermolysin ذي التطبيقات الواسعة في مجال الإنتاج الغذائي والصناعي.تم الحصول على 33 عزلة بكتيرية محبة للحرارة تعود إلى النوع البكتيري B. stearothermophilus من 25 نموذج تربة مختلفة لمحافظات العراق.فحصت قابلية إنتاج العزلات لإنزيم Thermolysin نوعياً وكمياً وتبين اختلاف العزلات من حيث الإنتاجية ووجد إن العزلة B. stearothermophilus SK422 منتجة لأعلى كمية من الإنزيم وصلت إلى 900 وحدة/ ملليتر.استعمل وسط إنتاجي معقد أساس يحتوي على التربتون وخلاصة الخميرة. وتم تحديد التركيز الأمثل من التربتون وخلاصة الخميرة ليكون 0.65 و 0.5% على التتابع. وأمكن استبدال التربتون بالببتون أو مهضوم فول الصويا (سويتون) أو بانتون دون أن يؤثر ذلك في الإنتاج. وقد حدد تأثير تركيز بعض الأملاح بصورة مفردة أو بصورة خلطيه في إنتاج الإنزيم في الوسط الاساس المعقد، حيث وجد إن التركيز الأمثل للإنتاج هو 0.25% عند استعمال ملحي كلوريد الصوديوم اوكلوريد البوتاسيوم والتركيز 0.5% عند استعمال أملاح كبريتات المغنيسيوم او كلوريد الكالسيوم او كبريتات الامونيوم كما وجد إن الخليط الملحي كبريتات الامونيوم 0.5% وكلوريد البوتاسيوم 0.25% أعطى نتائج ايجابية في إنتاج الإنزيم تفوق استعمال الأملاح بصورة مفردة. كما درس تأثير إضافة بعض السكريات (السداسية والخماسية والمتعددة والبولي يول) إلى الوسط الزرعي المعقد وقد كان لتركيز 0.25% سكر الكلوكوز تأثير ايجابي في الإنتاج اعقبه 0.5%سكر الكالكتوز.